这幅画表现的是耶稣跟12个门徒共进最后一次晚餐的场景。耶稣得知自己已被弟子犹大出卖，差弟子彼得通知在愈越节的晚上与众弟子聚餐，目的并非吃饭，而是当众揭露叛徒。画中耶稣说了一句：你们单中有一个把我出卖了。十二个门徒听了后各自不同的表情。

圣经上并没有这一词语。“最后的晚餐”乃是指耶稣被钉十字架前的那一天晚上，在耶路撒冷城内的一座楼上，和十二门徒的最后一次进餐。