半固体培养基是一种介于液体培养基和固体培养基之间的培养基。通常将少量的凝固剂加入到液体培养基中即可制出（以琼脂为例，它的用量在0.2~0.7%之间）。

该培养基有时可用来观察微生物的动力，有时用来保藏菌种，亦可用来观察厌氧菌的分离和菌种鉴定等。